Разбавление спермы синтетической ЛГЦЖ-средой и эквилибрация проводятся так же, как и при замораживании спермы в полипропиленовых соломинках (при температуре +4°С в течение 4 ч).
Замораживание спермы в открытых гранулах проводят на фторопластовых пластинках или на поверхности твердой двуокиси углерода («сухой лед»). Фторопластовую пластину с лунками, зафиксированную в держателе, опускают в жидкий азот и охлаждают до прекращения его кипения.
Охлажденную пластину держателем устанавливают на 4-6 см ниже верхнего края сосуда. После испарения жидкого азота поверхность пластины протирают марлевым тампоном, а затем с помощью градуированных пипеток, шприца или разливочной машины разливают сперму в лунки объемом 0,2 см3. Температура пластины в это время составляет -160-170°С. Температуру пластины в процессе замораживания контролируют электронным термометром с термопарами и таймером. Через несколько секунд, после затвердевания гранул спермы, пластину помещают на расстояние 5-10 см от поверхности жидкого азота на 1-2 мин. После этого пластину погружают на 1 мин в жидкий азот, где происходят дальнейшее охлаждение гранул до -196°С и отделение их от поверхности пластины. Пластину осторожно поднимают из жидкого азота до верхнего края сосуда, собирают пластмассовым шпателем гранулы в охлажденные заранее канистры и переносят их в жидкий азот на хранение.
Для замораживания спермы быков в гранулах на поверхности твердой двуокиси углерода блоки «сухого льда» распиливают на пластины толщиной 4-5 см и специальным прессом из нержавеющей стали делают лунки . Из шприца или пипетки сперму накапывают непосредственно в лунки объемом 0,2 см3.
После замораживания образовавшиеся гранулы собирают и ссыпают в охлажденные в жидком азоте канистры, которые помещают для хранения в жидкий азот.
