Сперму в соломинках оттаивают в водяной бане при температуре 38-40°С в течение 8-10 с. Соломинку обтирают стерильной марлевой салфеткой и, держа за конец, встряхивают для того, чтобы воздушный пузырек опустился к пробке.
Острыми ножницами отрезают пробку с одного конца соломинки, опускают её во флакон или ампулу с 1 см3 2,9%-ного раствора натрия цитрата нейтрализованного, отрезают второй конец соломинки. После перемешивания каплю разбавленной спермы наносят на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и оценивают по подвижности. После оценки спермы флакон закрывают пробкой и ставят в термостат при температуре 38°С. Через 5 ч повторяют оценку по подвижности, которая должна быть не менее одного балла.
Оттаивание спермы, замороженной в открытых гранулах, проводят следующим образом: одну гранулу помещают во флакон (или ампулу) с 1 см3 2,9%-ного раствора натрия цитрата нейтрализованного, находящийся в водяной бане при температуре 38-40°С. Флакон (или ампулу), не доставая из водяной бани, осторожно покачивают до оттаивания гранулы, после чего вынимают из воды и ставят на стол при температуре 18-20°С. Категорически запрещается оттаивать гранулы при комнатной температуре, а также оттаивать несколько гранул в одном флаконе. Оттаянную сперму оценивают по подвижности, затем повторяют оценку через 5 ч хранения при 38°С.
Качественная оттаянная сперма должна иметь подвижность не менее 4 баллов, полноценных сперматозоидов с прямолинейно поступательным движением в дозе – не менее 10-15 млн, выживаемостью при 38°С – не менее 5 ч, с отрицательным коли-титром. Для оттаивания спермы используют различные оттаиватели, бани и биологические термостаты.
Биологические исследования замороженной спермы быков проводят дважды: через 24 ч после замораживания и при передаче в стационарное хранилище (банк спермы). Сперму отправляют в хозяйство не ранее, чем через 30 дней карантинного срока.
При снижении качественных показателей спермы уже проверенных на плодовитость быков-производителей для установления причин дополнительно используют объективные методы качества спермы как свежеполученной, так и после замораживания-оттаивания: подсчет патологических форм сперматозоидов; определение физиологической резистентности показателя живучести, иммунологический и акроскопический методы оценки качества спермы.
